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PCR 반응을 위한 표준 과정

표준 PCR 프로세스는 세 단계로 나뉩니다.


DNA 변성: (90 ℃ -96 ℃): 이중 가닥 DNA 주형은 열 작용하에 수소 결합 절단을 거쳐 단일 가닥 DNA를 형성합니다.


어닐링: (60 ℃ -65 ℃): 시스템 온도가 감소함에 따라 프라이머는 DNA 주형에 결합하여 국소 이중 가닥을 형성합니다.


연장: (70 ℃ -75 ℃): Taq 효소의 작용 (약 72 ℃, 최고의 활동) 하에, dNTP는 출발 물질로 사용되며, 프라이머의 3 '말단으로부터 5' → 3 '말단의 방향으로 연장되어 주형에 상보적인 DNA 가닥을 합성한다.


변성, 어닐링 및 확장의 각 사이클 후에 DNA 함량은 두 배가됩니다. 오늘날, Taq 효소 활성이 짧은 증폭 영역으로 인해 최적이 아니더라도 일부 PCR은 단시간에 복제될 수 있다. 따라서 60 ℃와 65 ℃ 사이에서 동시에 어닐링과 연신을 포함하는 2 단계 방법을 사용하여 하나의 온도 상승을 감소시키고 공정을 감소시키고 반응 속도를 향상시킬 수 있습니다.